大阪における正教会の宣教は明治初期、ロシアから来日した日本の亜使徒大主教 聖ニコライ（カサートキン）の情熱的な宣教活動によって始まりました。

聖ニコライは大阪を西日本宣教の重要な拠点と位置づけ、幾度もこの地を訪れて信徒たちを激励し、信仰の礎を築きました。戦禍による旧会堂の焼失など数々の苦難を乗り越え、吹田市山手町の現在地において今も変わらぬ正教の光を灯し続けています。

大阪出身の正教徒・パウェル中井木菟麻呂（なかい つぐまろ）は、聖ニコライの右腕として正教会訳聖書および数々の祈祷書の漢文・和漢混淆文翻訳に生涯を捧げました。

中井の生家は、大阪大学文学部の源流とされる大坂の町人学問所「懐徳堂」です。中井が遺した格調高く、詩篇のリズムに富む祈祷文の言葉遣いは、難解でありながら朗誦しやすく、今日でも日本正教会の奉神礼で歌い継がれています。

聖堂には、ペテルブルクでロシア正教イコンの技法を修めた日本初の女性洋画家・山下りん（白林狂）による貴重な生神女イコンが大切に守られています。

また、鐘楼には革命前のロシアで鋳造された大鐘を含む大小6口の鐘があり、主日や大祭のたびに厳かな祈りの音色を街に響かせています。